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* 快速检测试剂系列 *         农药残留检测过程中的常用问题解答 

 

 

农药残留检测过程中的常用问题解答

 1、容易引起农药食物中毒的农药
        答:目前农业生产中使用的化学农药,大体可以分为杀虫剂、杀菌剂和除草剂三大类,其中品种最多、用量最大、最容易引起农药食物中毒的是有机磷类杀虫剂。杀菌剂和除草剂的防治对象是病原微生物和杂草,与人类的亲缘关系甚远,一般来说毒性都比较低,不容易引起中毒。有机磷杀虫剂则作用于昆虫的神经传导系统,昆虫的神经传导方式几乎与人类是相同的,因而对人的毒性都比较大,目前绝大多数食物农药中毒都是由有机磷杀虫剂(特别是甲胺磷)所引起的。

2、有机磷及氨基甲酸酯类农药对人体的危害性
        答:食用含有过量有机磷及氨基甲酸酯类农药的蔬菜,会引起头晕、多汗、全身乏力,继而出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻、胸闷、视力模糊、瞳孔缩小等症状;严重可出现昏迷、呼吸困难、麻痹而死亡。值得注意的是,若长期进食被农药污染的蔬菜,会不知不觉地发生慢性农药中毒,影响人的神经功能、视力调节机能,甚至还会发生“三致”(致畸胎、致癌变、致细胞遗传物质突变)。婴儿和儿童在受食物中农药残余物的危害方面,同成年人存在着质和量的差异。因为他们的神经系统、消化系统和其它系统仍在形成之中,肝脏代谢和分解毒素的能力较差,免疫系统也未得到充分的发育。另一方面,与体重相比,儿童吃的水果和蔬菜比成年人更多。美国的一份调查报告表明:美国数百万儿童在5岁以前从农药中吸收的一些致癌物质占他们一生吸收总量的35%,儿童平均在1岁以前,从20种常吃食物中吸收的8种农药已达到一生所能接受的安全药量。

3、农药残留量较高的蔬菜
        答:由于蔬果食用部位的不同,生长季节的不同,以及对昆虫适口性的差异,各种蔬菜上农药残留也有较大的差异。根据农残检测部门提供的监测资料和蔬菜农药食物中毒情况来看,下列蔬菜的农药残留情况比较严重:菜心、小白菜、芥兰、枸杞、西洋菜、通心菜和芥菜等。应列为农残检测的重点对象。

4、农药残留检测有哪些方法?

5、为什么要开展农药残留快速检测?
        答:在商品经济运行中,某些农民法律意识淡薄,为图眼前利益大量使用禁用、限用的农药防治病虫害;随意增加农药的使用剂量、使用次数和用药浓度,甚至违反农药安全间隔期,当日喷药,次日采摘上市等因素导致不少消费者食用后发生急性中毒事故。所以必须严格控制市场准入,维护消费者的权益。农药残留的传统检测方法必须在实验室进行,但由于实验室的建设成本较大、设备数量有限;而且实验室的样品检测周期较长,对于许多蔬菜可能在还没有得出检测报告之前就已销售殆尽了;另一方面,实验室的样品检测费用较高,许多廉价、普通食用而又容易出问题的蔬菜要用成百上千的检测费用来全面保障食用者的安全是不现实的;还有,实验室检测的工作量较大,工作效率低。由此可知,随着社会的发展,急需一种或多种快速检测手段用来作为实验室检测的辅助方法,对大量样品加以筛选定性,以减少送实验定量检测的压力。因此,农药残留快速检测方法也就应运而生。

6、我公司的农残快速检测产品有哪些?
        答:请参见网页 http://www.laiter.com.cn/prod_jcsj_shipinanquan.htm 

7、农药速测卡(简称速测卡)与农药检测卡(简称检测卡)有何不同?
        答:本公司研制的农药速测卡与农药检测卡,都是用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留检测,其功能完全相同,主要区别在于包装上,农药速测卡每盒20片,60盒为一箱,而农药检测卡每条300片,出现这两种包装上的差异主要是针对不同用户的需求。农药速测卡与农药检测卡均为定性检测法,该方法操作简便、快速,结果准确,经该法检测出的阳性结果可用气相色谱法进一步检测所含农药成分及确切含量。

8、使用农药速测卡系列产品应注意的几个问题
         答:由于本品采用的是生物化学测定法,主要靠胆碱酯酶这样一种活性蛋白质起作用,因而与一般的化学试纸有明显不同,使用时应特别注意以下几个问题:
         1) 本品测试的最佳温度是37℃,当温度低于25℃时显色反应明显减慢,应采取适当的保温措施。
         2) 本品最佳酸碱度为pH 7.5-7.8,样品处理或农药标样的稀释最好用0.1 mol/L磷酸缓冲液(大约是2%磷酸氢二钾+0.2%磷酸二氢钾)。
         3) 整体测定样品时,样品不要剪得太碎,大约1.0cm2最好,以免大量的叶绿素等物质释放出来,影响结果的判断。同时,用玻棒搅拌时也不要将菜叶捣烂,原因如前所述,有条件的用户可配置超声波清洗器或震荡仪。每处理完一个样品的剪刀或吸管必须清洗干净才能处理下一个样品,以免交叉污染。
        4) 表面测定法中两菜叶摩擦的目的在于洗脱菜叶表面附着的残余物质,只需轻轻在滴液处搅拌几次。如果用力过大,将菜叶弄烂会渗出叶绿素和维生素等物质,会对显色结果造成影响。且滴液至速测卡时,只需将菜叶上的洗脱液滴到白片上,不能将叶汁挤出滴入。滴液时,以滴在白片上呈凸球状为佳。
        5) 用有机溶剂作抽提液,应除去有机溶剂后用缓冲液稀释再进行测定,因为有机溶剂通常会使胆碱酯酶部分失活,容易造成假阳性结果。
        6) 每批测定最好设一个空白对照,把洗脱液直接加到白色药片上即可。
        7) 反应时间以白色药片与红色药片接触时计起,以3min时间的显色情况为准。而随着时间的延长,反应会继续进行,白色药片上的颜色会逐渐变深,但此时已不宜再进行结果的判定。
        8) 结果判定时,对照的白片呈蓝色;样品白片的蓝色与对照相当为阴性,可安全食用;白片的蓝色比对照的浅为弱阳性,说明农药残留量相对较低,经洗、浸、烫、炒等过程可安全食用;白片不变蓝或显白色为强阳性,说明农药残留较高,不宜食用或通过特别处理后才能食用。

9、洗脱液的主要成分及作用是什么
        答:洗脱液主要成分是用蒸馏水配成的缓冲溶液,它可以帮助把蔬菜上的农药洗出来,更重要的是保证检测过程有一个稳定的酸碱度,这对酶反应来说是很重要的。在没有洗脱液或洗脱液不足的情况下,可用蒸馏水、纯净水或0.1mol/L磷酸缓冲液(pH 7.5-7.8)代替,大约相当于2%磷酸氢二钾加0.2%磷酸二氢钾。

10、可否用自来水代替洗脱液?
        答:自来水无法起到平衡酸碱度的作用,此外自来水一般都经过消毒处理,含有消毒剂以及其他的对酶活性产生影响的成分。因此不宜采用自来水代替洗脱液。

11、为何选择在蔬菜叶近叶尖部滴洗脱液?
        答:据科学研究表明,含有农药残余物的菜叶,其叶尖部农残含量最高。由于蔬菜农药的施放多采用喷洒方式,而蔬菜叶的表面积较大,所以菜叶的农药残留量比菜茎和整株都高,不同的蔬菜也存在着差异。同时,菜叶表面农残含量又以叶近尖部位最高,原因在于附着在菜叶表面的雨水、露水等一般最终流经叶尖部集成液滴后流向地面,因此,当农药喷洒于蔬菜时,叶片会往叶尖部下坠,造成该部位积累大量的农药。选择该部位滴洗脱液,能较准确地反映整株蔬菜的农药残留情况。

12、如何检测葱、蒜等易产生植物次生代谢物的蔬菜?
        答:姜、葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶活性有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。检测这些菜时浸提液要求使用洗脱液或0.1mol/L磷酸缓冲液(pH 7.5-7.8)。

13、如何检测瓜果、块茎类水果和蔬菜?
        答:农药速测卡可以用于冬瓜、土豆、苹果和梨等果蔬类食品农残检测。一般采用整体测定法,且浸提液要使用洗脱液或0.1mol/L磷酸缓冲液(pH 7.5-7.8),原因在于瓜果、块茎类水果和蔬菜其酸碱度一般都偏酸或偏碱,要用缓冲液来调节酸碱度以达到速测卡所需的最适酸碱度。

14、如何检验本品是否失效?
        答:农药速测卡是生化制品,很多因素如高温、高湿、光照、重金属和酸碱等都有可能造成产品失效,判断本品是否失效,一是查看红色药片有无严重褪色,二是取一片速测卡,加一滴洗脱液于白色药片上,立即对折并用手捏3min,看看白色药片能否变蓝,如不显蓝色,说明产品已失效。如果出现产品质量问题,可与我们联系。

15、茶叶中农药残留是如何造成的?
        答:茶叶中的农药残留来源于两个方面:一是直接喷施:茶叶中农药残留的直接来源是农药喷施在茶树叶片上,其中部分农药渐渐渗入茶树组织内部,在日光、雨露及茶树体内各种酶类等因素的影响下,逐渐分解和转变成其他无毒物质;部分农药留在叶片表面,如果在这些农药还没有完全降解时便采摘下来,这种新鲜茶叶经加工后制成的成品茶叶中便会含有农药残留。二是间接来源:茶叶中农药残留的间接来源包括多种途径,如从土壤中吸收、由水携带和空气漂移等。

16、茶叶中农药残留主要有哪些?
        答:据茶叶卫生相关文献表明,目前,茶叶中多用有机磷类和菊酯类等农药,有机氯类农药虽已禁用,但由于其有效期很长,土壤中残留的有机氯类农药会少量吸收到茶叶当中。

17、哪些茶叶农药残留较高?
        答:据中国茶叶研究机构的相关检测资料显示,在我国各种茶叶的农药残留检测中,绿茶农药残留问题最小,红茶次之,不同种类中以乌龙茶和花茶中的农药残留问题比较突出。

18、为什么需要检测茶叶中的农药残留?
        答:农药残留是当前茶叶出口和内销中遇到的最大卫生质量问题,不仅严重危害着人们的身体健康,而且对我国茶叶的内外贸易都有着极其不利的影响。其中农药在茶叶种植中的不规范使用和缺乏有效的监管措施是导致茶叶农残居高不下的罪魁祸首。因此,要把好茶叶的质量关,必须要从生产的源头抓起,并结合高效的检测监控手段,才能有效地保障茶叶的品质。

19、为什么检测茶叶不能用普通农药速测卡检测?
        答:成品茶叶中含有多种复杂成分:如多酚类化合物、生物碱、蛋白质、芳香物质、氨基酸、果胶质、糖类、矿物质和色素等,这些复杂的成分容易对普通农药速测卡上的酶造成影响。为此我们专门研制了一种能够消除干扰的快速检测方案----- 茶叶农药速测卡。

20、茶叶农药速测卡有何优点?
        答:茶叶农药速测卡可以有效的避免成品茶叶中多种成分的干扰,对各种茶叶中的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行快速的检测,使用方便,检测结果准确。

21、酶抑制率法检测原理
        答:在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显示剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

22、酶抑制率法与速测法有何区别?
        答:酶抑制率法和速测卡法均是运用胆碱酯酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速现场检测方法。两者的区别主要表现在操作特点及结果判定上的不同:从操作特点看,速测卡法操作简便,不需要配制试剂,可以不需要任何仪器设备单独使用,不需要专业人员,非常适用于现场快速测定;酶抑制率法操作时需要简单的试剂配制(主要是溶解、稀释等操作),检测时需要用分光光度计或农残检测仪等设备,相比速测卡法而言,酶抑制率法的操作人员需具备一定的专业知识和操作技能。结果判定方面,两者的判定方法不同,速测卡法是采用目测,通过对颜色的观察来判定结果,而酶抑制率法则由仪器读数并且计算结果。因此速测卡法具有操作简便的特点,但其结果判定在一定程度上存在着对颜色观察的主观性,而酶抑制率法操作较速测卡法复杂,但结果判定方面的主观因素则相对较小。

23、农残速测试剂如何保存?
        答: 1) 农残速测试剂开封前如何保存?开封前的试剂可整套放置于4-10℃冰箱中保存。
        2) 农残速测试剂开封后如何保存?A、酶试剂、显色剂(溶液)及底物(溶液)均放置于4-10℃冰箱中保存。B、缓冲剂(液)放置于室温环境中保存即可。

24、农残速测试剂检测时是否必需使用分光光度计或农残检测专用仪器?
        答:是的。农残速测试剂的原理是通过胆碱酯酶水解乙酰胆碱,生成的水解产物与显色剂作用产生黄色物质,其颜色的深浅与水解产物的量成正相关,在412nm波长下有最大吸收峰,因此检测时需借助分光光度计或农残检测专用仪器才能进行。

25、农残速测试剂是否具有通用性?
        答:是的,农残速测试剂可以在不同厂家生产的各种型号分光光度计或农残检测仪器上使用。但在检测时仪器的使用需按照仪器配套说明书进行操作,试剂的使用需按试剂配套的说明书进行操作。若用户不能确定所使用的仪器是否可用本公司生产的农残速测试剂,建议用户先与我公司技术人员进行沟通,以便确定仪器的型号及配套的试剂。

26、农残速测试剂系列产品检测时有哪能些注意事项?
         答:1) 样品放置的时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性.。
        2) 采用农残检测仪器检测时,对照一般只能放第一测试通道。
        3) 采用农残检测仪器检测时,只测对照或对照和样品同时检测时,一般需按仪器的“对照”键或类似功能的按键开始检测。
        4) 采用农残检测仪器检测时,只测样品时,一般需按仪器的“样品”键或类似功能的按键开始检测,其抑制率则会以该仪器最近一次所测对照结果进行计算。
        5) 器具专用原则:任何用于移液的器具和容器都应各自贴上标签,单独使用,以免交叉污染。
        6) 试剂只出不入原则:测试时,从任何试剂瓶吸出的试剂,禁止再次注射回试剂瓶。
        7) 在加液时,移液器的吸嘴不宜接触到试管(或反应瓶)内壁及反应溶液的液面,以免污染整瓶试剂。
        8) 每加入一种试剂必须摇匀后再加入下一种试剂,以便溶液中各试剂充分反应。
        9) 环境温度对测试的影响:当环境温度过低时(一般低于20℃),测试时需作必要的保温措施。
       10) 任何试剂使用时,用一瓶打开一瓶,用完后才使用新的,防止变质;用剩的试剂必须放冰箱保存。

27、是否每次检测都需要作一个对照测试?
        答:一般而言,同一天的同一批检测可共用一个对照,即在当天第一次测试时作一个对照,该天内其他的样品检测可共用该对照值进行计算,有些农残检测仪器要求每次重新开机后都要进行对照测试,具体需参考仪器的相关说明。但是,有以下因素变化时必须重新进行对照测试:
        1) 任何试剂的变更(包括试剂发生污染);
        2) 操作人员的变动(主要指加液及测试的人员,一般不包括样品处理及其他辅助人员的变动);
        3) 实验场所的变化(包括场地、环境、温度等的变化);
        4) 实验方法的变动;
        5) 主要设备的变更(如移液器、检测仪器等);
        6) 检测现场环境温度频繁大幅度波动;
        7) 其他可能影响检测结果的变化因素。

28、使用农残检测仪器检测时,样品和对照测试可否同时进行?
         答:这与所使用的农残检测仪器有关,有些仪器只能先测对照,后测样品,即对照和样品必须分开进行测试。有些仪器则可以对照测试及样品测试同时进行,也可以分开测试。因此用户在检测前务必对仪器进行充分的了解。

29、使用农残检测仪器检测时,可否同时检测多个样品?
         答:一般而言,多通道的农残检测仪器可以同时检测多个样品。

30、同时检测多个样品,在加底物的环节中,第一个样品和最后一个样品之间相隔时间太长是否对结果造成影响?
        答:在加底物的环节中,可预先将底物加入比色杯,待静置时间一到,马上将反应瓶中的反应液倒入已经加有底物的比色杯,并迅速放入测试通道进行测试。这样可以减少同时检测多个样品时因加底物时间过长而造成的误差。

31、用过的吸嘴、比色杯、反应瓶等器具能否重复使用?如何清洗及维护?
       答:用过的吸嘴、比色杯、反应瓶等器具可以重复使用,每次使用后都必须清洗干净,以免污染到其他样品。清洗时可将吸嘴、比色杯 、反应瓶等器具先用自来水加少量洗洁精浸泡,然后用自来水清洗干净,再用纯净水或蒸馏水冲洗两至三遍,晾干后即可再用。晾干时建议将器皿口部朝下倒扣于器皿框内以便使其中的积水流出。器皿内壁若有大量水垢或污物粘附时,可用工业酒精或稀盐酸进行清洗。

32、在实际样品检测时,结果有时出现负值或抑制率大于100%是否正常?
       答:由于操作存在一定误差,只要抑制率在-10%和110%之间均属正常情况,反之表示操作失误,需重新检测。

33、问:按照NY/T 448-2001方法测得农残速测试剂空白对照值ΔA0≥0.9,是否影响检测结果,如何解决?
       答:对检测灵敏度无明显影响,最好将酶试剂用缓冲液稀释后再测,稀释的比例可根据ΔA0值的高低确定,如2:1或1:1(酶试剂与缓冲液的体积比)。

34、问:样品处理中若用到滤纸进行过滤,是否对检测结果造成影响?
        答:正常情况下,滤纸不会影响农残检测结果。但有些质量较差的滤纸上面含有很多有害物质及化学残留物,容易使检测出现假阳性结果。

35、问:农残速测试剂中的底物必须用蒸馏水溶解吗?
        答:不是,可以用蒸馏水溶解,也可以用缓冲液溶解。

36、问:农残速测试剂中底物溶液已经变黄还能用吗?
        答:底物溶液正常颜色为无色澄清液体,若为黄色,说明已经受到污染。如果用受污染的底物溶液能够检测出正常的酶活性则可以继续使用;如果无法测出正常的酶活性,提示受污染的底物可能变质,则不能再用。

37、问:对农药的检测灵敏度与农残检测仪器有关吗?
        答:跟仪器没有直接关系,主要和农残速测试剂的酶试剂有关,因此选择对农药高度敏感的酶试剂才能达到较高的检测灵敏度。

38、问:我现在用的农残速测试剂是以抑制率≥70%判定为阳性结果的,请问贵公司有符合这种方法的试剂吗?
        答:有。根据您(用户)的描述,您现在所用的方法是按照行业标准(NY/T 448)设计的,我公司有专门的配套试剂,您可以联系我公司销售人员或技术员了解更加详细的产品信息。

39、问:在用表面测定法检测蔬菜农药残留时,两片菜叶摩擦后汁液吃绿色,还能检测吗?
        答:不可以。这是由于操作不当所造成的。表面测定法中两菜叶摩擦的目的在于洗脱菜叶表面附着的残余物质,只需轻轻在滴液处搅拌几次,不宜用力过大,也不能将两片菜叶用手捏合在一起摩擦。如果用力过大,将菜叶弄烂会渗出叶绿素和维生素等物质,会对显色结果造成影响。且滴液至速测卡时,只需将菜叶上的洗脱液滴到白色药片上,不能将叶汁挤出滴入。

40、问:农药速测卡的包装袋中有一根蓝色的塑料管是做什么用的?
        答:这是用于防潮的,包装打开后,这根蓝色的塑料管会慢慢吸潮变色,即失去作用。

41、问:在测同一株蔬菜的不同部位农药残留时为什么结果不同呢?
        答:根据科学的研究表明,农药在蔬菜表的残留并不是均匀分布的,一般叶面上的农药残留量会比根茎部位的要高,而菜叶尖部的农药残留又比叶面上的其他部位要高。一些含有果蒂的蔬菜其蒂部的农药残留会明显的高于其他部位。因此同一株蔬菜的不同部位所测的农残结果不一定完全相同。所以在抽样时,应放大采样源的总量,并选择有代表性的部位进行检测,如抽一把蔬菜取其叶尖部位进行检测,而不是取某一株进行检测。

42、问:农残速试剂中的检验用水(溶解缓冲剂的水)可能用自来水代替吗?
        答:水一般都经过消毒处理,含有消毒剂以及其他的对酶活性可能产生影响的成分。因此不宜采用自来水作为检验用水。可以用蒸馏水、去离子水、纯净水作为检验用水。

 

                                                                

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